RUMUSAN DAN PENJELASAN UJIAN
Malaria ialah penyakit bawaan nyamuk, hemolitik, demam yang menjangkiti lebih 200 juta orang dan membunuh lebih daripada 1 juta orang setahun.Ia disebabkan oleh empat spesies Plasmodium: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, dan P. malariae.Plasmodia ini semuanya menjangkiti dan memusnahkan eritrosit manusia, menghasilkan menggigil, demam, anemia, dan splenomegali.P. falciparum menyebabkan penyakit yang lebih teruk daripada spesies plasmodial lain dan menyumbang kepada kebanyakan kematian malaria.P. falciparum dan P. vivax adalah patogen yang paling biasa, bagaimanapun, terdapat variasi geografi yang besar dalam taburan spesies.
Secara tradisinya, malaria didiagnosis melalui demonstrasi organisma pada sapuan tebal darah periferi yang diwarnai Giemsa, dan spesies plasmodium yang berbeza dibezakan melalui penampilannya dalam eritrosit yang dijangkiti1.Teknik ini mampu membuat diagnosis yang tepat dan boleh dipercayai, tetapi hanya apabila dilakukan oleh ahli mikroskop mahir menggunakan protokol yang ditetapkan2, yang memberikan halangan utama untuk kawasan terpencil dan miskin di dunia.
Kit Ujian Pantas Malaria Pf / Pan Antigen dibangunkan untuk menyelesaikan halangan ini.Ujian ini menggunakan sepasang antibodi monoklonal dan poliklonal kepada protein spesifik P. falciparum, protein berulang histidin II (pHRP-II), dan sepasang antibodi monoklonal kepada plasmodium laktat dehidrogenase (pldH) Falciparum dan atau mana -mana tiga plasmodia yang lain.Ia boleh dilakukan oleh kakitangan yang tidak terlatih atau berkemahiran minima, tanpa peralatan makmal.
PRINSIP
Kit Ujian Pantas Malaria Pf/ Pan ialah immunoassay kromatografi aliran sisi.Komponen jalur ujian terdiri daripada: 1) pad konjugat berwarna burgundy yang mengandungi antibodi anti- pHRP-II tetikus berkonjugasi dengan emas koloid (konjugasi emas pHRP II) dan antibodi anti-pLDH tetikus berkonjugasi dengan emas koloid (konjugasi pLDH-emas),
2) jalur membran nitroselulosa yang mengandungi dua jalur ujian (jalur Pan dan Pv) dan jalur kawalan (jalur C).Pan band prasalut dengan antibodi anti-pLDH monoklonal yang mana jangkitan dengan mana-mana empat spesies plasmodia boleh dikesan, jalur Pf disalut terlebih dahulu dengan antibodi anti-pHRP-II poliklonal untuk pengesanan jangkitan Pf, dan jalur C disalut dengan IgG anti-tikus kambing.
Semasa ujian, isipadu spesimen darah yang mencukupi disalurkan ke dalam telaga sampel (S) kaset ujian, penimbal lisis ditambah kepada telaga penimbal (B).Penampan mengandungi detergen yang melisiskan sel darah merah dan membebaskan pelbagai antigen plasmodium, yang berhijrah melalui tindakan kapilari merentasi jalur yang dipegang dalam kaset.pHRP-II jika terdapat dalam spesimen akan terikat pada konjugat pHRP II-emas.Imunokompleks kemudiannya ditangkap pada membran oleh antibodi anti-pHRPII pra-bersalut, membentuk jalur Pf berwarna burgundy, menunjukkan keputusan ujian positif Pf.pLDH jika terdapat dalam spesimen akan terikat pada konjugat emas pLDH.Imunokompleks kemudiannya ditangkap pada membran oleh antibodi anti pLDH pra-bersalut, membentuk jalur Pan berwarna burgundy, menunjukkan keputusan ujian positif plasmodium.Sekiranya tiada jalur Pan, keputusan ujian positif untuk mana-mana tiga plasmodia lain boleh disyorkan.
Ketiadaan mana-mana jalur ujian (Pan dan Pf) menunjukkan keputusan negatif.Ujian ini mengandungi kawalan dalaman (jalur C) yang sepatutnya mempamerkan jalur berwarna burgundy imunokompleks IgG anti-tikus kambing / IgG tetikus (pHRP-II dan pLDH-emas konjugat) tanpa mengira perkembangan warna pada mana-mana jalur ujian.Jika tidak, keputusan ujian tidak sah dan spesimen mesti diuji semula dengan peranti lain.
